1. Hva inkluderer ikke-kliniske studier?
Svar:Ikke-kliniske eksperimenter inkluderer farmakologiske studier, generelle toksisitetstester, toksikokinetiske og ikke-kliniske farmakokinetiske eksperimenter, reproduksjonstoksisitetstester, genotoksisitetstester, karsinogenitet og andre tester (fototoksisitet, avhengighet, immunotoksisitet), etc. I tilfeller med kombinasjonsterapi, ikke-kliniske sikkerhetsstudier av kombinasjonsterapi kan også gjennomføres. For en viss høy andel (større enn 10 % av den totale systemiske eksponeringen og eksponeringsnivået i dyrestudier er lavere enn menneskelig eksponering), kan det være nødvendig å utføre ikke-kliniske sikkerhetsstudier av metabolitter.
2. Hva er hensikten med ikke-klinisk sikkerhetsevaluering?
Svar:Formålet med ikke-klinisk sikkerhetsevaluering inkluderer generelt å belyse karakteristika for toksisitetsreaksjoner relatert til målorganer, doseavhengighet, eksponeringsforhold og potensiell reversibilitet. Denne informasjonen kan brukes til å estimere den sikre startdosen og doseområdet for kliniske studier på mennesker (som nevnt tidligere, NOAEL må innhentes i toksikologiske eksperimenter for å beregne MRSD, maksimal anbefalt startdose), og for å bestemme kliniske overvåkingsindikatorer for potensielle bivirkninger.
3. Hvilke ikke-kliniske studier kreves for førstegangsstudier?
Svar:For dette spørsmålet er det først nødvendig å avklare typen medikament. ICH M3 (R2) er anvendelig for vanlige situasjoner i legemiddelutvikling og gir generelle veiledningsprinsipper. For biologiske legemidler bør ikke-kliniske studier utføres i henhold til kravene i ICH S6.
⑴Farmakokinetikk:Før IND-innlevering er data om metabolismen til undersøkelsesproduktet i forskjellige arter og in vitro-metabolismedata hos mennesker, samt plasmaproteinbindingshastighet, tilstrekkelig. Informasjon om absorpsjon, distribusjon, in vivo metabolisme og utskillelse bør fullføres før store kliniske studier (vanligvis fase 3). PK-absorpsjonseksperimenter utføres generelt i flere arter før IND-innlevering og PCC-bestemmelse for bedre å forstå PK-egenskapene til stoffet i forskjellige arter, selv om det ikke er nødvendig her, noe som er litt merkelig.
⑵Sikkerhetsfarmakologi:Evaluering av effektene på kardiovaskulære, sentralnerve- og respirasjonssystemer bør fullføres før IND-innlevering, som er en kombinasjon av sikkerhetsfarmakologiske standardtester. Supplerende sikkerhetsfarmakologiske eksperimenter kan utføres under kliniske studier om nødvendig.
⑶Gjentatt dose toksisitet:Generelt arrangeres en kortsiktig kronisk toksisitetstest basert på det tidlige doseringsskjemaet til IND. Hvis doseringsperioden må forlenges senere, er en langsiktig kronisk toksisitetstest nødvendig for å støtte det.
⑷Genotoksisitet:Med relativt lave kostnader kan kombinasjonen av genotoksisitetstest fullføres før IND-innlevering.
⑸Kreftfremkallende egenskaper:Karsinogenitetstesting bør fullføres før legemiddelgodkjenning.
⑹Reproduksjonstoksisitet:Observasjoner og evalueringer av reproduksjonssystemet bør inkluderes i toksisitetstester med gjentatte doser før IND-innlevering for å foreløpig vurdere reproduksjonstoksisitet, med streng prevensjon i kliniske studier som er tilstrekkelig. Fase I/II reproduksjonstoksisitetsstudier bør fullføres før store kliniske studier, og fase III reproduksjonstoksisitetsstudier bør fullføres før godkjenning.
⑺Fototoksisitet:Fototoksisitetsvurdering bør fullføres før IND-innlevering. Hvis den molare absorpsjonsevnen er større enn 1000 M-1cm-1, anses det å være en risiko for fototoksisitet, og fototoksisitetstesting bør utføres før store kliniske studier.
4. Hvordan bør doser settes i toksikologiske tester? Hvordan bør høyeste dose velges?
Svar:Med henvisning til "Tekniske veiledningsprinsipper for toksisitetstester for gjentatte doser av medikamenter," "I prinsippet skal høye doser indusere åpenbare toksiske reaksjoner hos dyr, lave doser skal være ekvivalent med eller høyere enn den effektive dosen hos dyr eller klinisk bruk, og middels doser bør settes mellom høye doser og lave doser basert på den toksiske mekanismen og egenskapene for å undersøke dose-respons forholdet til toksisitet."
I praksis, med tanke på de dyre kostnadene ved toksikologiske tester, er det å gjennomføre en doseområdefinnende test (DRF) med noen få ikke-menneskelige primater den mest kostnadseffektive og arbeidsbesparende metoden. Dosen for DRF-tester bør også settes ytterligere basert på foreløpige sikkerhetsstudier utført under tidlig PCC-bestemmelse og farmakologiske studier. Mange institusjoner gjennomfører nå også akutte toksisitetstester ved siden av DRF-tester, som er ikke-GLP-tester, som nevnt i M3 (R2), etter 3R-prinsippet for å redusere bruken av dyr.
For grupper med lav, middels og høy dose brukes vanligvis en avstand på 2-3 ganger. I formelle toksikologiske tester er den ideelle situasjonen at høydosegruppen kan demonstrere åpenbar toksisitet, og lav- eller middeldosegruppene kan brukes som NOAEL.
I tillegg, for valg av høyeste dose, gir M3 (R2) også standardsvar. Enkelt sagt bør den høyeste dosen i toksikologi enten være den maksimalt tolererte dosen (MTD) eller den maksimale gjennomførbare dosen (MFD, som kan forstås som den maksimale dosen som dyr kan tolerere basert på produkt- og dyreegenskaper), eller den bør oppnå eksponeringsmetning, eller eksponeringsnivået bør være tilstrekkelig høyt (nå 50 ganger den tiltenkte kliniske dosen). Generelt anses 1000 mg/kg/dag som tilstrekkelig med mindre den tiltenkte kliniske dosen når 1g/dag, og eksponeringsnivået på 1000 mg/kg ikke når 10 ganger det kliniske eksponeringsnivået, i så fall må du øke ytterligere dose til 10 ganger det kliniske eksponeringsnivået, eller 2000 mg/kg/dag, eller MFD.
5. Hvilke studier innen ikke-klinisk sikkerhetsforskning trenger for å følge GLP, og hvilke gjør ikke?
Svar:Farmakologiske og farmakokinetiske studier trenger ikke å følge GLP, mens studier av sikkerhetsfarmakologi, genotoksisitet, reproduksjonstoksisitet og toksisitet ved gjentatte doser må følge GLP.
6. Hvor lang varighet av ikke-kliniske toksisitetsstudier med gjentatt dose?
Svar:Kravene til varighet for å støtte klinisk utprøving og markedsgodkjenning er forskjellige og må være spesifikke for doseringsperioden for kliniske studier. For eksempel, for pasienter med multippel sklerose, er minimum planlagt klinisk prøveperiode to år. Derfor, når du registrerer pasienter med multippel sklerose i kliniske studier, kreves det en 6-måneds gnager- og 9-måneds kronisk toksisitetsstudie for ikke-gnagere, noe som er tilstrekkelig til å støtte markedsgodkjenning. For ikke-onkologiske legemidler brukes vanligvis en 4-ukers kronisk toksisitetsstudie for å støtte en doseringsperiode som ikke overstiger 4 uker for førstegangs kliniske studier.
7. Hvordan velge forsøksdyr for ikke-klinisk sikkerhetsvurdering?
Svar:Vanligvis brukes to typer dyr, gnagere med rotter er det foretrukne valget, og ikke-gnagere med Beagle-hunder er det foretrukne valget. Selvfølgelig bør også spesifikke produktspesifikke analyseprinsipper følges. For små molekyler bør utvalget av arter hovedsakelig ta hensyn til de metabolske egenskapene til undersøkelsesproduktet hos dyr som ligner mennesker. Det kan henvises til "Analyse og identifiseringstest av metabolitter av undersøkelsesprodukter i CD-1 mus, SD-rotter, beaglehunder, cynomolgus-aper og menneskelige levermikrosomer", som velger arter med metabolske egenskaper som ligner på mennesker, som er arter med lignende mengder og typer metabolitter som mennesker. I tillegg bør den utvalgte arten være følsom for undersøkelsesproduktet. Basert på tidligere erfaring, for et lite molekylært medikament, kan dets metabolske egenskaper hos Beagle-hunder ligne på mennesker, men med lav eksponering.
